0사진 준비
PlateLab 을 열기 전에 사진을 폴더별로 나눠 두면 뒤의 단계가 거의 자동으로 됩니다.
- plate 전체를 한 장에 찍습니다. well 을 하나씩 찍을 필요는 없습니다. 같은 사진 안의 well 은 조명·초점이 같아서 비교가 공정합니다.
- 가능하면 카메라 높이를 고정합니다. 사진마다 plate 위치가 비슷하면 크롭 위치를 한 번만 맞추면 됩니다.
- 세포주(또는 조건)마다 폴더를 나눕니다. 폴더 이름이 그대로 Cell line 이 됩니다.
seeding density/ ← 이 폴더를 통째로 고릅니다 ├─ H1666/ ├─ H2009/ 20260702_075800.jpg 20260702_075812.jpg … ├─ HCC15/ 20260702_075547.jpg 20260702_075602.jpg … └─ HCC366/
1사진 불러와서 well 자르기 Crop
사진에서 well 부분만 원형으로 잘라 냅니다. 잘린 well 하나가 이후 모든 단계의 단위입니다.
사진 불러오기
- 왼쪽 위 폴더 선택을 누르고
seeding density처럼 세포주 폴더들이 들어 있는 상위 폴더를 고릅니다. 하위 폴더(3단계까지)의 사진을 모두 읽습니다. - 또는 탐색기에서 폴더나 사진을 PlateLab 창 아무 곳에 끌어다 놓아도 됩니다.
- 오른쪽 아래에
6장 불러옴 · 폴더 H2009, HCC15처럼 읽은 폴더가 표시됩니다.
H2009 · 1과 파일 이름이 보입니다.썸네일 읽는 법 · 필요 없는 사진 빼기
H2009·1 = 폴더 이름 · 그 폴더 안 사진 순번.- 전체 plate 를 확인용으로 찍은 사진처럼 필요 없는 사진은 썸네일 오른쪽 위 ×를 누르거나, 그 사진을 보는 중에 Delete 키를 누르면 빠집니다.
- 이미 잘라 낸 사진이면 확인창이 뜨고, 그 사진의 크롭·정량·조건도 함께 빠집니다. 순번은 다시 매기지 않으므로 이름이 바뀌지 않습니다.
- ← → 로 이전·다음 사진으로 넘어갑니다.
Plate 규격 고르기
- 한 사진에서 well 여러 개를 자를 때: 종류에서
6-well등을 고르면 행 × 열이 자동으로 들어갑니다. - 한 사진에서 well 하나만 자를 때: 행 × 열을
1 × 1로 둡니다. 위 예시가 이 경우입니다. - well 지름 (mm)은 면적을 mm² 로 바꿀 때 씁니다. 6-well 은 34.8 mm 가 기본입니다.
원을 well 에 맞추기
- 원 안쪽을 끌면 원 전체가 움직입니다.
- 원 테두리를 끌면 크기가 바뀝니다. 커서가 화살표 모양으로 바뀌는 곳이 테두리입니다.
- 미세 조정: Ctrl+방향키 1 px, Ctrl+Shift+방향키 10 px.
- 슬라이더로 간격·반지름·회전을 직접 바꿔도 됩니다.
사진마다 위치가 다를 때
세포주마다 따로 찍었거나 plate 위치가 사진마다 다르면 사진마다 따로를 고릅니다. 조정하면 그 사진만 바뀌고, 썸네일 왼쪽 위에 개별 표시가 붙습니다.
| 새 사진 시작 | 다음 사진으로 넘어가면 | 이럴 때 |
|---|---|---|
| 공통 위치 | 처음 정한 공통 위치에서 시작 | 대부분 같은 자리이고 몇 장만 다를 때 |
| 직전 사진 | 방금 맞춘 위치·크기를 그대로 가져감 | 같은 세포주 사진을 연달아 조금씩 고칠 때 |
- 이 위치를 전체에 = 지금 사진의 위치를 모든 사진에 적용 · 공통 위치로 = 이 사진만 되돌리기.
- 그리드로 안 맞는 사진은 오른쪽 이 이미지에서 검출(원형 well 자동 검출)이나 수동 ROI(클릭으로 원 추가·삭제)를 씁니다. 비스듬히 찍었으면 4점 보정으로 plate 네 모서리를 클릭해 펴 줍니다.
크롭 실행
- 오른쪽 대상을
전체 이미지로 두고 크롭 실행. - 폴더째 불러왔다면
폴더 이름으로 Cell line N개를 채웠습니다가 뜹니다. Plate Map 에 세포주가 이미 들어가 있다는 뜻입니다. - 잘린 well 이름은
H2009 · 3(한 사진에서 여러 well 이면H2009 · 3 · B2). - 크롭만 필요하면 PNG 묶음 저장으로 여기서 끝내도 됩니다.
위치를 고치고 크롭을 다시 실행해도, 같은 사진·같은 well 에 Plate Map 에서 넣어 둔 조건(Drug, Conc. 등)은 유지됩니다. 정량 결과는 다시 계산해야 합니다.
2보정하기 Enhance
그림(figure)에 쓸 밝기·대비 보정과, 정량 전에 조명 얼룩을 지우는 배경 빼기가 있습니다. 보정 없이 바로 Quantify 로 가도 됩니다.
표현용 보정 (정량에는 안 들어감)
- 슬라이더를 움직이거나 오른쪽 숫자 칸에 값을 직접 넣습니다.
- 슬라이더나 항목 이름을 더블클릭하면 기본값으로 돌아갑니다.
- 키보드: ↑↓ 항목 이동 · ←→ 한 칸 · Ctrl+←→ 열 칸 · Esc 로 빠져나오면 ←→가 다시 well 넘기기.
- 전체 적용을 눌러야 모든 well 에 같은 보정이 걸린 것으로 기록됩니다.
보정본 저장
- 이 well 저장 — 지금 보는 well 을 PNG 로 (1000 × 1000 px).
- 전체 ZIP — 모든 well 보정본 + 사용한 보정값
enhance_settings.json. 파일 이름 앞에 세포주가 붙습니다 (H2009_20260702_075812_A1_enh.png).
자주 쓰는 값 저장
아래 저장된 설정에서 이름을 넣고 현재 값 저장. 시작값으로 지정하면 ★가 붙고, 다음에 PlateLab 을 열 때 자동으로 적용됩니다. 이 브라우저에만 저장되므로 다른 PC 에서는 파일로 저장 / 파일 불러오기를 씁니다.
배경 빼기는 반지름보다 큰 덩어리를 배경으로 보고 지웁니다. colony 가 well 을 거의 덮으면 염색 자체가 지워집니다. H2009 에서 실제로 꽉 찬 well 이 100 % → 0.1 % 로 나왔습니다. 켜 두면 Enhance·Quantify 양쪽에 경고가 뜹니다.
3colony 면적 재기 Quantify
well 마다 colony 가 차지한 면적(Total Area, %Area)과 개수를 잽니다. 대표 지표는 면적입니다.
권장 설정 (여러 세포주 · seeding density)
| 기준 | 뜻 |
|---|---|
| well별 | well 마다 자동 threshold. 빈 well·꽉 찬 well 에서는 가를 곳이 없어 틀어집니다. 기존 ImageJ 매크로와 숫자를 맞출 때만. |
| 공통 | 여러 well 의 밝기 분포를 합쳐 기준 하나를 정해 모두에 씁니다. |
| 고정 | 직접 넣은 값을 모두에. 여러 plate 를 같은 기준으로 비교할 때. |
실행하고 확인하기
- 왼쪽 맨 아래 정량 실행.
- 썸네일 화면에서 well 마다 면적을 한눈에 봅니다.
- well 을 누르면 검수 화면으로 갑니다. Mask A(면적)가 colony 와 겹치는지 눈으로 확인하고, ←→ 로 넘기며 전부 봅니다.
「구멍 포함」이 켜져 있으면 colony 덩어리 사이 밝은 틈도 면적에 들어갑니다. 거의 꽉 찬 well 은 실제보다 조금 높게 나올 수 있습니다 (H2009 예: 틈 제외 83.8 %, 포함 96.7 %).
아주 옅게 염색된 colony 는 공통 기준에서 일부 빠질 수 있습니다. 검수 화면에서 확인하고 필요하면 고정으로 값을 조금 올립니다.
정량 설정도 Enhance 와 같이 저장된 설정에 이름을 붙여 저장·시작값 지정이 됩니다.
4조건 붙이기 Plate Map
well 마다 Cell line · Drug · Conc. · IR(Gy) · Replicate 를 지정합니다. 같은 조건끼리 묶여 평균·SD 가 나옵니다.
- well 원을 클릭하거나 끌어서 여러 개를 고릅니다.
- 왼쪽 칸에 넣을 값만 입력합니다. 비워 둔 칸은 기존 값을 유지합니다.
- 선택에 적용.
- 정규화 기준군에서 대조군을 고르면 그 군 평균이 100 % 가 되는 Relative colony area 가 계산됩니다.
- 같은 배치를 반복하면 템플릿 → 저장으로 JSON 을 남겨 다음 실험에 불러옵니다.
5내보내기 Export
| 버튼 | 무엇이 나오나 | 어디에 쓰나 |
|---|---|---|
| Prism 형식 복사 | 열 = 조건, 행 = replicate | Prism Grouped table 이나 Excel 에 바로 붙여넣기 |
| raw CSV | well 별 이름·조건·면적·%Area·threshold | 원자료 보관 |
| summary CSV | 조건별 n · 평균 · SD · SEM | 요약 표 |
| QC 리포트 CSV | well 별 threshold, 상한 적용, 입자 수, 배경 빼기 여부 | 검증 기록 |
| 이미지 ZIP | 크롭 원본 · Mask A · Mask B (골라서) | 보충 자료 |
| Methods 문장 복사 | 사용한 설정이 그대로 반영된 영문 문단 | 논문 Methods |
지표를 Relative colony area 로 골랐는데 값이 비어 있으면 Plate Map 에서 정규화 기준군(대조군)을 아직 고르지 않은 것입니다.
단축키
| 어디서 | 키 | 동작 |
|---|---|---|
| Crop | ← → | 이전·다음 사진 |
| Crop | Ctrl+방향키 | 원 위치 1 px (Shift 더하면 10 px) |
| Crop | Delete | 지금 사진 빼기 |
| Enhance | ← → | 이전·다음 well (항목을 고르지 않았을 때) |
| Enhance | ↑ ↓ | 보정 항목 고르기·이동 |
| Enhance | ← → / Ctrl+← → | 고른 항목 한 칸 / 열 칸 |
| Enhance | Esc | 항목에서 빠져나오기 |
| Quantify | ← → | 이전·다음 well (검수 화면으로 이동) |
| 어디서나 | 더블클릭 | Enhance 슬라이더·이름 → 기본값 |
막힐 때
| 증상 | 원인과 해결 |
|---|---|
| 정량 결과가 전부 0 | 「배경 빼기」가 켜져 있으면 빽빽한 colony 가 지워집니다. Enhance 에서 끄고 다시 정량 실행. |
| 꽉 찬 well 이 0 % 또는 아주 낮게 | Threshold 기준이 well별입니다. 공통으로 바꿉니다. |
| 세포주끼리 결과가 이상하게 끌려감 | 공통의 묶는 단위를 Cell line 별로. Plate Map 에 Cell line 이 들어가 있어야 합니다. |
| 폴더를 골랐는데 사진이 안 들어옴 | 폴더 선택 창은 Chrome·Edge 에서 열립니다(다른 브라우저는 폴더 업로드 방식으로 대체). 사진 확장자는 jpg · png · tif · bmp · webp. |
| 잘린 well 이름이 전부 A1 | A1 은 사진 안의 well 위치입니다. 사진을 폴더째 불러오면 H2009 · 3 처럼 폴더 · 순번으로 나옵니다. |
| 원이 well 과 안 맞음 | 원 안쪽을 끌어 옮기고 테두리를 끌어 크기를 맞춥니다. 사진마다 다르면 「사진마다 따로」. |
저장하고 이어 하기
- 오른쪽 위 세션 저장 — 크롭 위치, 보정·정량 설정, Plate Map 조건을 JSON 으로 받습니다. 사진은 들어가지 않습니다.
- 이어 할 때는 세션 불러오기 후 같은 사진을 다시 불러옵니다. 사진별 크롭 위치는 파일 이름으로 다시 붙습니다.
- 전체 초기화는 불러온 사진과 결과를 모두 지웁니다. 되돌릴 수 없습니다.
모든 계산은 브라우저 안에서 합니다. 사진이 서버로 올라가지 않으므로 미발표 데이터도 그대로 써도 됩니다.